抗猪PD-L1分子的单克隆抗体制备及免疫学特性分析

作者：彭金美; 李登云; 郭娟娟; 安同庆; 孙艳; 吴玉全; 陈家锃; 冷超粮; 田志军; 童光志

来源：中国预防兽医学报, 2013, (07): 578-581.

• PPD-L1分子
• PD-1/PD-L1通路
• 单克隆抗体 PD-L1
• PD-1/PD-L1 pathway
• monoclonal antibody

为制备抗猪程序性死亡因子配体1(PD-L1)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其免疫学特性,本研究将猪PD-L1基因的外膜区利用原核表达载体pET32a进行表达,以纯化的表达蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以表达PD-L1-Fc蛋白的293T细胞作为抗原,采用间接免疫荧光试验筛选杂交瘤培养上清,获得两株稳定分泌抗猪PD-L1 MAb的杂交瘤细胞系。MAb亚型鉴定均为IgG1型,轻链为κ链。Western blot试验表明这两株MAb均可以特异性识别PD-L1蛋白。流式细胞检测结果显示这两株MAb可以识别表达于293T细胞膜表面的PD-L1分子,但不能阻断PD-L1分...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 西北农林科技大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 中国农业科学院上海兽医研究所