重组腺病毒介导肝细胞生长因子转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

作者：范慧慧; 孙琰玮; 李宝平^*

来源：中国药物与临床, 2021, 21(22): 3653-3655.

• 转染
• 间质干细胞
• 肝细胞生长因子
• 腺病毒
• 大鼠

目的评价重组腺病毒介导肝细胞生长因子(Ad-HGF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的转染效率及对干细胞增殖的影响。方法 1只雄性Wistar大鼠,鼠龄4周,体质量约90 g。采用密度梯度离心法结合贴壁法分离培养大鼠BMSC,流式细胞仪进行鉴定;携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)转染BMSC,探索最佳感染指数(MOI),激光共聚焦显微镜观察转染效果,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比浊法(MTT)测定转染对BMSC增殖的影响;在最佳MOI时Ad-HGF转染BMSC,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定人HGF在不同时间的表达。结果成功培养大鼠BMSC,GFP成功表达,不影响细胞增殖(P>0.05);转染效率随MOI增大逐渐增加,在MOI=200时,效率达88.42%;Ad-HGF成功高效率转染MSC,HGF基因得到持续高表达,48 h时达最高水平。结论 Ad-HGF成功高效率转染大鼠BMSC,外源基因得到持续表达,不影响干细胞活性。

• 单位
  山西医科大学第二医院