摘要
目的探讨不同pH值环境下骨形态发生蛋白2(BMP-2)信号通路对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响。方法选取58周龄健康雄性SD大鼠,体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,取第4代VSMCs进行实验,设正常对照组、pH7.4+高磷组、pH7.1+高磷组和pH7.7+高磷组。采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(AKP)活性,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BMP-2、Smad1及Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达。结果与正常对照组相比,pH7.4+高磷组大鼠VSMCs的钙含量增加、茜素红染色钙化结节增多,BMP-2、Smad1、Runx2 mRNA表达及AKP活性均增高(均P<0.05);与pH7.4+高磷组相比,pH7.1+高磷组大鼠VSMCs的钙含量减低、茜素红染色钙化结节减少,BMP-2、Smad1、Runx2 m RNA表达及AKP活性均降低(均P<0.05),pH7.7+高磷组大鼠VSMCs的钙含量增加、茜素红染色钙化结节增多,BMP-2、Smad1、Runx2 m RNA表达及AKP活性均增高(均P<0.05)。结论胞外酸性环境(pH7.1)抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,胞外碱性环境(p H7.7)促进高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,其机制可能是通过BMP-2信号通路介导VSMCs表型转化。
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单位河北医科大学第四医院