摘要
目的明确乳腺癌细胞株ZR-75-1中RNA结合蛋白38(RNPC1)的表达对孕激素受体(PR)表达的调节作用。方法采用慢病毒转染法过表达RNPC1基因,以实时荧光定量PCR(qRTPCR)和Western blot法检测RNPC1调节PR表达的情况;以放线菌素实验研究RNPC1调控PR表达的机制。采用免疫组化法检测80例乳腺癌组织中RNPC1蛋白和PR蛋白的表达。结果免疫组化检测结果显示,在PR蛋白表达阳性的29例乳腺癌组织中,RNPC1蛋白高表达16例;在PR蛋白表达阴性的51例乳腺癌组织中,RNPC1蛋白低表达41例。qRT-PCR检测结果显示,过表达RNPC1组和过表达对照组乳腺癌ZR-75-1细胞中,PR mRNA的相对表达量分别为1.764±0.028和1.001±0.037,差异有统计学意义(P<0.01);而干扰RNPC1组和干扰对照组乳腺癌ZR-75-1细胞中PR mRNA的相对表达量分别为0.579±0.007和1.000±0.002,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot法检测结果显示,在乳腺癌ZR-75-1细胞中,过表达RNPC1可使PR蛋白的表达增加;而敲除RNPC1的表达后,PR蛋白的表达减少。放线菌素实验结果显示,乳腺癌ZR-75-1细胞过表达RNCP1后,PR mRNA的稳定性增加,其半衰期由过表达对照组的4.0 h增加为6.5 h:而敲除RNPC1的表达后,PR mRNA的稳定性降低,其半衰期由干扰对照组的4.1 h降为3.0 h。结论 RNPC1在调节乳腺癌ZR-75-1细胞PR mRNA和蛋白的表达中发挥重要作用。
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单位南京医科大学第一附属医院