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摘要
家蚕双性基因dsx通过选择性剪接产生性别特异剪接体而影响体细胞性别发育,之前对Bmdsx进行c DNA末端快速扩增(RACE)分析时获得一个雌特异剪接体BmdsxF2。为揭示BmdsxF2的生物学功能,构建由A4启动子驱动BmdsxF2表达的转基因异位表达载体,通过显微注射和荧光筛选,获得2个BmdsxF2转基因品系L1和L2。RT-PCR结果显示BmdsxF2在2个转基因品系雄蚕中都成功异位表达;连续6代观察都未发现L1和L2的个体发育表型异常;W染色体特异性PCR检测表明所有转基因雌性个体的染色体组型都为ZW型,没有ZZ型;连续6代调查L1和L2的个体性别比例都遵循1∶1的正常比例;实时荧光定量PCR检测在2个转基因品系雄性个体中,BmdsxF2的下游靶基因SP1和Vg都明显上调表达,而PBP的表达则明显下调,表明雌特异剪接体BmdsxF2能够调控Bmdsx下游靶基因的表达,暗示BmdsxF2同样可参与家蚕体细胞性别发育调控。
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