Avalia o de m谷todos para manuten o e preserva o de bact谷ria esporulada produtora da enzima CGTase = Evaluation of methods for maintenance and preservation of sporulating bacteria producer of CGTase enzyme

作者：Cristiane Moriwaki; Cassiana Mazzer; Rubia Pazzetto; Graciette Matioli

来源：Acta Scientiarum - Health Sciences, 2009.

• preserva o biologica
• ciclodextrinas
• celulas imobilizadas
• biological preservation
• cyclodextrins
• immobilized cells

A conserva o de c谷lulas sem mudan as morfol車gicas, fisiol車gicas ou gen谷ticas 谷 uma necessidade da biotecnologia. Bacillus firmus cepa 37 谷 uma bact谷ria esporulada produtora da enzima ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase), que transforma o amido em ciclodextrinas (CDs). O objetivo deste estudo foi avaliar a manuten o e preserva o de B. firmus cepa 37 estocada em meio de cultivo s車lido, solo est谷ril e em glicerol a baixa temperatura (-70oC). Para avalia o do melhor m谷todo de manuten o da bact谷ria foram utilizados procedimentos de imobiliza o das c谷lulas em matrizes inorganicas. As c谷lulas imobilizadas foram submetidas ao teste do efeito da biomassa inicial e 角 microscopia eletr nica de varredura (MEV). O repique n o foi um m谷todo adequado, pois a cepadiminuiu a produ o de CGTase. A estocagem em solo est谷ril mostrou-se eficaz e a produ o da enzima mantida constante. A conserva o a baixas temperaturas tamb谷m foi satisfat車ria, com contagem de c谷lulas praticamente a mesma ap車s 360 dias. A imobiliza o, avaliada por MEV, n o mostrou diferen a na adsor o das c谷lulas conservadas pelosdiferentes m谷todos. O mesmo ocorreu para o teste do efeito da biomassa inicial, que apresentou maior produ o de beta-CD quando do uso de 1,5 g de c谷lulas. The conservation of cells without morphologic, physiologic or genetic changes is a biotechnology necessity. Bacillus firmus strain 37 is a sporulating bacteria that produces the cyclodextrin lycosyltransferase(CGTase) enzyme, which transforms starch into cyclodextrins (CDs). This study aimed to evaluate the maintenance and preservation of B. firmus strain 37 stored in a solid medium, sterile soil and in glycerol at low temperature (-70oC). In order to evaluate the best bacteria maintenance method, cell immobilization procedures were used on inorganic matrices. The immobilized cells were submitted to the initial biomass effect test and scanning electron microscopy (SEM). Periodic transfer was not an appropriate method, because the strainreduced the production of CGTase. The storage in sterile soil proved effective and the enzyme production remained constant. The conservation in low temperatures was also satisfactory, with cell counts practically the same after 360 days. The immobilizationevaluated by SEM did not show any difference in the adsorption of the cells preserved by the different methods. The same happened for the initial biomass effect test, which presented higher beta-CD production when 1.5 g of cells was used.