人胚胎成纤维细胞饲养层支持人精原干细胞的生长

作者：王毓斌; 陈斌; 王颖超; 张志玲; 王鸿祥; 卢永宁; 向祖琼; 胡凯; 杨怡珂; 韩银发; 汪铮; **鑫; 黄翼然

来源：中华男科学杂志, 2008, 14(12): 1063-1068.

DOI：10.13263/j.cnki.nja.2008.12.001

• 精原干细胞
• 人胚胎成纤维细胞
• 饲养层
• 分离
• 纯化
• 细胞培养
• 人

目的:探讨人精原干细胞分离、纯化及以人胚胎成纤维细胞为饲养层培养的方法和条件。方法:利用两步酶法和Percoll不连续密度离心法分离、纯化人精原干细胞,在人胚胎成纤维细胞饲养层上培养;用免疫组织化学方法检测精原干细胞表面标志SSEA-1和OCT4;检测精原干细胞克隆碱性磷酸酶活性;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测精原干细胞相关基因的表达。结果:精原干细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上可以存活并增殖形成集落。集落未分化标志检测显示SSEA-l、OCT4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,并表达精原干细胞相关基因。结论:人胚胎成纤维细胞饲养层可以支持人精原干细胞的生长。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院; 消化疾病研究所