通过增加痰液量和超声裂菌提高结核分枝杆菌荧光定量PCR检出率

作者：张军; 王晓飞; 王瑞东; 韩敏; 景玲杰; 陈晋

来源：检验医学, 2014, 29(03): 215-218.

• 结核分枝杆菌
• 实时荧光定量聚合酶链反应
• 超声
• 痰液

目的通过增加痰液量和超声破碎法提取痰液中的结核菌DNA,提高结核分枝杆菌实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的检出率。方法选择206例肺结核患者,以103例非结核患者作为对照组;肺结核患者同时进行结核菌涂片,并在美国BD公司的MAGIT960仪器上进行液体快速培养结核菌。另收集至少5 mL的痰液,加入23倍体积的4%氢氧化钠液化后,取1 mL按照采用常规方法抽提痰液中的结核菌DNA,剩余部分采用改进的超声破碎法提取结核菌DNA;两者同时进行实时荧光定量PCR检测。结果采用增量超声法,对于涂片阳性、培养阳性的结核患者,阳性检出率由87.5%(可信区间为81.4%93.6%)提升至95.5%(可信区间为91.7%99.4%)(P<0.05)。对于涂片阴性、培养阳性的患者,阳性检出率由57.4%(可信区间为47.5%67.4%)提高至83%(可信区间为75.4%90.6%)(P<0.01)。增量超声法比常规方法,定量值平均提高14倍以上。结论通过增加痰液量和超声破碎法提取痰液中的结核菌DNA,可提高实时荧光定量PCR结核分枝杆菌的检出率,值得进一步推广应用。

• 单位
  同济大学附属上海市肺科医院