5-氮胞苷浓度对体外骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞的影响

作者：程芮; 王士雯; 曹丰; 孟玲; 王韫芳; 李艳华; 李泱; 裴雪涛

来源：中华老年多器官疾病杂志, 2005, 4(03): 196-199+220.

DOI：10.3969/j.issn.1671-5403.2005.03.012

• 骨髓间充质干细胞
• 心肌细胞
• 5-氮胞苷

目的 探讨不同浓度5-氮胞苷(5-aza)体外诱导小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的可能性及其对细胞扩增速度的影响。方法 10 ml骨髓，1．077g／ml Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(MNCs)，第2代传代细胞分别加入3，5，10μmol／L浓度5-aza化学诱导24 h，与对照组连续培养4周，细胞爬片免疫荧光法鉴定结蛋白desmin及心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达，电镜观察诱导细胞的超微结构变化。结果 5-aza化学诱导后MSCs形态变长、增大，排列更加紧密、整齐，5和10μmol／L组可见较多的多核细胞，部分管状结构，诱导率分别为36％和31％，无显著性差异；3 μmol／L组上述变化的细胞极少，3种浓度及对照组4周后细胞扩增数量分别为(3．81±0．40)×10~6、(3．76±0．62)×10~6、(3．67±0．80)×10~6及(2．90±0．21)×10~6，10μmol／L组增殖速度明显减慢(P＜0．05)。各组诱导后的细胞均未见自发搏动。免疫组化提示desmin及cTnI表达阳性，5和10μmol／L组电镜下出现肌丝样结构、心房颗粒及细胞间的缝隙连接。结论 小型猪MSCs经5、10μmol／L 5-aza化学诱导可分化为心肌样细胞，其中5 μmol／L 5-aza不仅可以诱导心肌样细胞而且对细胞增殖速度影响小。

• 单位
  解放军总医院; 军事医学科学院