摘要

以‘怀黄’菊(Chrysanthemum×morifolium ‘Huaihuang’)为材料,进行微滴玻璃化超低温处理,优化微滴玻璃化法超低温保存中的几项关键因素,对其再生苗的遗传稳定性进行探究,并对再生苗的抗冷性进行评价。结果显示:优化预培养基、装载和脱水时间后,冻存后茎尖成活率显著提高;超低温保存后,暗培养30 d+光培养90 d可长成正常植株;使用分子标记技术(ISSR)确认再生苗未发生变异,说明该体系一定程度上保持了再生苗的遗传稳定性。再生苗抗冷性实验证明,微滴玻璃化超低温处理降低了‘怀黄’菊再生苗的活性氧自由基水平、膜脂过氧化程度,提高了保护酶的活性,从而提高了再生苗的抗冷性。