miR-509通过调控二磷酸腺苷-核糖基化因子6对人舌鳞状细胞癌SCC15细胞生物学行为的影响

作者：卢娜; 潘睿; 韩炜

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2022, 36(03): 217-221.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2022.03.001

• 舌鳞状细胞癌
• SCC15细胞
• miR-509
• 二磷酸腺苷-核糖基化因子6
• 凋亡
• 侵袭

目的 探讨miR-509对人舌鳞状细胞癌SCC15细胞生物学行为的影响及对二磷酸腺苷-核糖基化因子6(adenosine diphosphate-ribosylation factor 6, ARF6)信号通路的调控作用。方法 取对数生长期SCC15细胞，随机分为miR-509 mimic组(转染miR-509 mimic)、miR-509 inhibitor组(转染miR-509 inhibitor)、mimic NC组(转染mimic NC)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC)、对照组(仅转染脂质体)。转染24 h, 5组采用实时荧光定量PCR法检测miR-509相对表达量，采用流式细胞术检测细胞凋亡，采用Transwell小室试验检测细胞侵袭能力，采用Western blot法检测ARF6蛋白相对表达量。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-509与ARF6的靶向关系。结果 miR-509 mimic组miR-509相对表达量(6.17±0.25)、细胞凋亡率[(12.46±0.37)%]均高于对照组[4.28±0.36、(3.08±0.30)%]和mimic NC组[4.25±0.34、(2.98±0.41)%](P<0.05),侵袭细胞数[(8.82±2.07)个]少于对照组[(27.40±3.26)个]和mimic NC组[(28.36±3.14)个](P<0.05),ARF6蛋白相对表达量(0.27±0.05)低于对照组(0.62±0.05)和mimic NC组(0.64±0.04)(P<0.05);miR-509 inhibitor组miR-509相对表达量(2.50±0.28)、细胞凋亡率[(2.16±0.45)%]均低于对照组和inhibitor NC组[4.26±0.33、(3.06±0.24)%](P<0.05),侵袭细胞数[(125.26±3.36)个]多于对照组和inhibitor NC组[(28.93±2.85)个](P<0.05),ARF6蛋白相对表达量(0.86±0.06)高于对照组和inhibitor NC组(0.68±0.06)(P<0.05);miR-509 inhibitor组miR-509相对表达量、细胞凋亡率均低于miR-509 mimic组(P<0.05),侵袭细胞数多于miR-509 mimic组(P<0.05),ARF6蛋白相对表达量高于miR-509 mimic组(P<0.05);对照组、mimic NC组和inhibitor NC组miR-509相对表达量、细胞凋亡率、侵袭细胞数、ARF6蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。ARF6 WT+miR-509 mimic组荧光素酶活性(0.52±0.17)低于ARF6 WT+mimic NC组(1.55±0.22)(t=6.417,P<0.001);ARF6 MUT+miR-509 mimic组荧光素酶活性(1.53±0.26)与ARF6 MUT+mimic NC组(1.56±0.25)比较差异无统计学意义(t=0.144,P=0.892)。结论 miR-509上调可促进人舌鳞状细胞癌SCC15细胞凋亡、抑制其侵袭，可能通过靶向抑制ARF6蛋白表达发挥作用。

• 单位
  华北理工大学; 秦皇岛市军工医院; 保定市第三中心医院