大黑花芸豆凝集素的分离纯化及温度、pH、色氨酸修饰对其活性的影响(英文)

作者：李建; 徐小超; 鲍锦库

来源：天然产物研究与开发, 2008, (05): 787-792.

• 大黑花芸豆凝集素
• 分离纯化
• 温度
• pH
• 化学修饰
• 凝血活性
• 荧光光谱

大黑花芸豆(Phaseolus multiflorus.Willd)种子经匀浆、浸取、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析(DEAE-Sepharose)、阳离子交换层析(CM-Sepharose)和Sephacryl S-200分子筛层析得到凝集素样品(PML)。经SDS-PAGE检测为一分子量约为28k的单一条带,Sephacryl S-100凝胶过滤测得其表观分子量约为56kD表明PML是由两个相同亚基组成的蛋白。温度低于60℃时,PML较为稳定,当温度达80℃时,其凝血活性完全丧失;pH为5.6~9对活性影响不大,pH为12时,活性大部分丧失;高温和强碱对荧光光谱有较大影响。NBS修饰Trp结果表明,在天然状态下有3个色氨酸分子被修饰,其中第二和第三个色氨酸分子对其活性至关重要。

• 单位
  四川大学; 生命科学学院