HSP90高表达细胞株的建立及细胞增殖性状的改变

作者：陈雪梅; 邹飞

来源：中国应用生理学杂志, 2004, (04): 65-68.

DOI：10.13459/j.cnki.cjap.2004.04.022

• HSP90
• NIH-3T3细胞
• 电穿孔
• 细胞周期

目的建立稳定高表达热休克蛋白90(HSP90)细胞株,研究其对细胞增殖的影响。方法含人HSP9013全长基因的重组质粒pSmycHSP经亚克隆、纯化、酶切鉴定后,用电穿孔法转染到小鼠成纤维细胞系NIH3T3细胞内。经G418筛选、克隆分离培养,用免疫细胞化学、免疫印迹鉴定阳性克隆。以转染空质粒的NIH3T3细胞为对照,用MTT法、流式细胞术测定,分析HSP90高表达对细胞增殖和细胞周期的影响。结果转染pSmycHSP的NIH3T3细胞HSP90染色增强,生长速度减慢,S期DNA含量降低。结论己建立稳定高表达热休克蛋白90(HSP90)NIH3T3细胞株;转染pSmycHSP的NIH3T3细胞能够有效地表达HSP90,影响细胞周期,使细胞增殖迟滞。

• 单位
  南方医科大学