摘要

目的:探讨黄精对自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退的保护作用及机制。方法:17月龄SPF级雄性SD大鼠随机分为衰老模型组及黄精低(0.125 g/kg)、高(0.5 g/kg)剂量组,衰老模型组和黄精给药组分别给予普通饲料和含药饲料饲养5月;以5月龄雄性SD大鼠为正常对照组。大鼠称量质量后处死,取出睾丸和附睾并称量质量,计算其脏器指数;采用伊红染色检测附睾中精子活率,血球计数板光镜下计数精子数量并计算精子浓度;HE染色观察睾丸组织形态变化,统计分析生精上皮厚度、生精小管直径及各类生精细胞数目;TUNEL染色检测生精细胞凋亡情况,并计算生精细胞凋亡指数;Western Blot检测睾丸组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2及Nrf2通路相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达;生化试剂盒检测大鼠睾丸组织中Caspase-3、SOD、CAT、GSH-Px、MDA水平;免疫荧光法检测Nrf2在生精细胞中的表达和定位。结果:与模型组比较,黄精可显著升高衰老大鼠睾丸质量及其指数、精子活率、精子浓度。组织病理学检查结果显示,黄精能明显改善衰老大鼠睾丸组织形态,显著增加生精上皮厚度及生精细胞数目,对生精小管直径无明显影响。TUNEL结果显示,黄精可显著减少衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡,降低凋亡指数。Western Blot及免疫荧光结果显示,黄精可显著促进Nrf2核移位,显著上调Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达,显著下调Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达及Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值。生化试剂盒检测结果显示,黄精可显著升高衰老大鼠睾丸组织中SOD、CAT、GSH-Px水平,降低Caspase-3、MDA水平。结论:黄精可通过激活Nrf2信号通路,提高睾丸组织抗氧化能力,进而抑制生精细胞凋亡,减轻自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退。

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