改良DNA染色法对支原体检测的效果评估

作者：王晓燕; 刘军; 于佳; 王凯; 房世娣; 魏然; 冯德杰^*

来源：微生物学免疫学进展, 2022, 50(04): 31-36.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2022.04.007

• DNA染色法
• 支原体
• Vero细胞
• 细胞培养
• DAPI

目的 评估改良的DNA染色法检测支原体的效果。方法 使用无水乙醇为固定液和DAPI为荧光染料进行改良的DNA染色法，通过改变细胞接种浓度、细胞培养时间、接种支原体的浓度以及接种猪鼻支原体、口腔支原体和精氨酸支原体，观察支原体污染细胞进行DNA染色后的效果变化。结果 Vero细胞接种浓度在1.0×105个/mL时，DNA染色效果最好；支原体在传代培养5 d后进行DNA染色效果更好；接种支原体污染的细胞上清，胞核外有较少的蓝色荧光，而接种支原体污染的细胞培养物的胞核外可见大量的蓝色荧光；猪鼻支原体的DNA染色效果比口腔支原体和精氨酸支原体的DNA染色效果好。结论 改变细胞接种浓度、细胞培养时间、支原体浓度以及种类，都能观察到不同的DNA染色结果，从而证明改良的DNA染色法也能用于支原体DNA染色检查。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司