摘要
目的检测鼻咽癌CNE-2细胞中Survivin表达变化与信号通路PTEN/PI3K/AKT的表达差异,探讨对鼻咽癌CNE-2细胞的增殖和凋亡产生的影响。方法设计特异性siRNA转染CNE-2细胞,抑制细胞内Survivin表达;构建过表达质粒转染CNE-2细胞,促进细胞内Survivin表达;以CCK8法检测各组中不同时间CNE-2细胞活性; RT-PCR法检测CNE-2细胞中Survivin、PI3K、PTEN、AKT的mRNA表达。蛋白免疫印迹法检测CNE-2细胞中Survivin、PI3K、PTEN、AKT、p-AKT各相关蛋白表达情况。结果 (1)CCK8:利用CCK8检测细胞活性,与空白对照组相比,Survivin抑制组活性降低; Survivin过表达组活性增加。(2) RT-PCR结果显示:Survivin抑制组Survivin mRNA表达抑制率为(41. 9±6. 9)%(P <0. 01),PI3K mRNA表达抑制率为(43. 3±7. 2)%(P <0. 01),AKT mRNA表达抑制率为(38. 7±4. 1)%(P <0. 01),PTEN mRNA表达抑制率无统计学意义; Survivin过表达组Survivin mRNA过表达率为(203. 8±17. 1)%(P <0. 01),AKT mRNA过表达率为(239. 0±34. 2)%(P <0. 01),PTEN、PI3K mRNA表达率无统计学意义。(3) Western blot结果:Survivin抑制组与阴性对照组相比,PTEN、p-AKT蛋白表达量无明显差异,Survivin、PIK3、AKT蛋白表达量显著下调。Survivin过表达组与阴性对照组相比,PTEN、PIK3、p-AKT蛋白表达量无明显差异,Survivin、AKT蛋白表达量显著上调。结论在鼻咽癌CNE-2细胞中,Survivin调控AKT,与AKT呈正相关。Survivin抑制时,能有效抑制CNE-2细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡; Survivin过表达时,能有效促进CNE-2细胞增殖,抑制其发生凋亡。对细胞的增殖及凋亡起正协同作用。
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