牡荆苷对结肠癌移植瘤小鼠TAMs/CD8+T细胞活性的调控作用

作者:袁鑫; 刘莹; 梁健; 刘华桢; 侯少贞; 赖小平; 黄松
来源:中药新药与临床药理, 2022, 33(06): 754-761.
DOI:10.19378/j.issn.1003-9783.2022.06.005

摘要

目的 探讨牡荆苷(Vitexin,VIT)作用于肿瘤相关巨噬细胞及细胞毒性T淋巴细胞(TAMs/CD8+T)的抗结肠癌作用机制。方法 采用BALB/c雄性小鼠构建CT26结肠癌皮下移植瘤模型,造模成功后按肿瘤体积随机分为对照组及牡荆苷高、低剂量组(40、20 mg·kg-1);每天1次,连续灌胃给药14 d,对照组给予等体积蒸馏水,每3 d测量1次肿瘤体积。给药结束后剖取小鼠肿瘤、脾脏和胸腺称定质量,并采用HE染色法对肿瘤和脾脏进行组织病理学检查;采用免疫荧光法分析肿瘤组织中TAMs表型;流式细胞术分析小鼠肿瘤和脾脏组织中的CD8+细胞数量。选择RAW264.7巨噬细胞模型,采用MTT法检测牡荆苷对细胞活性的影响;以牡荆苷单独(5、10μmol·L-1)或分别联合脂多糖(LPS,100 ng·mL-1)、LPS+γ干扰素(INF-γ,100 ng·mL-1+50 ng·mL-1)、白细胞介素4(IL-4,10 ng·mL-1)进行干预后,采用流式细胞术分析iNOS+TAMs、CD206+TAMs细胞比例;Griess法测定培养液中NO含量。结果 在结肠癌移植瘤小鼠模型上,与对照组比较,牡荆苷高剂量组肿瘤体积增长明显减缓、肿瘤质量明显降低(P+CD8+T细胞占比明显升高(P+TAMs计数和培养液中NO含量显著升高(P+TAMs数量显著增加(P+TAMs计数和培养液中NO明显减少(P+细胞比例明显升高(P+TAMs数量明显减少(P+TAMs极化,激活CD8+T细胞发挥抗肿瘤作用。

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