摘要
为提高喜树内生真菌发酵产10-羟基喜树碱(10-hydroxyamptothecin, HCPT)能力,以泡盛曲霉CS24为发酵菌种,以HCPT产量为考核指标,通过单因素实验和Plackett-Burman实验,筛选出发酵温度、通风量和玉米浆干粉含量等3个影响发酵的显著因素;通过最陡爬坡实验确定中心组合设计的水平中心;通过Box-Behnken实验、响应面分析获得最优培养基为:玉米浆干粉13 g·L-1、花生饼粉25 g·L-1、蔗糖10 g·L-1、糊精30 g·L-1、麦芽糖15 g·L-1、Mg2+ 0.5 mmol·L-1;最优发酵工艺为:发酵温度29℃、通风量0.6 vvm、搅拌转速380 r·min-1、初始pH值5.0。在此条件下,HCPT产量达到171.6 mg·L-1,比优化前(94.6 mg·L-1)提高了44.9%,为工业化发酵生产HCPT奠定了理论和实践基础。
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单位江苏省肿瘤防治研究所; 江苏省肿瘤医院; 南京医科大学