食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用

作者：刘立兵; 南汇珠; 孙晓霞; 姜彦芬; 王金凤; 王建昌

来源：食品科学技术学报, 2018, 36(01): 89-94.

• 蜡样芽胞杆菌
• 等温扩增
• 实时荧光RPA
• 检测方法

为实现简便快速地检测蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),根据Gen Bank中蜡样芽胞杆菌16 S RNA序列设计特异性引物和exo探针,建立了一种实时荧光重组酶聚合酶扩增方法,在39℃恒温下仅需20 min即可完成检测。该方法特异性扩增蜡样芽胞杆菌16 S RNA基因片段,对其他芽胞杆菌和非芽胞杆菌无扩增;以蜡样芽胞杆菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.0×10-3ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致。人工污染实验表明,当大米饭中蜡样芽胞杆菌污染量≥1.5×104CFU/g时,即可通过real-time RPA方法检出,所需时间仅为613min;而当污染量≥1.5×105CFU/g时,才能通过real-time PCR方法检出,所需时间至少为30 min(Ct值为2031)。

• 单位
  河北出入境检验检疫局