对映-贝壳杉烯型二萜类化合物J32对胰腺癌细胞的作用及机制

作者：刘胜; 赵梦圆; 金巍; 段长恩; 可钰^*

来源：新乡医学院学报, 2023, 40(09): 810-817.

• 对映-贝壳杉烯型二萜
• DNA损伤
• 增殖
• 迁移
• 凋亡
• 活性氧
• 共济失调毛细血管扩张和Rad3相关蛋白-细胞周期检查点激酶1-p53-Cyclin D1通路

目的 探讨对映-贝壳杉烯型二萜类化合物J32对胰腺癌细胞SW1990的作用及机制。方法 将SW1990细胞随机分为对照组、0.5μmol·L-1 J32组、1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组、4.0μmol·L-1 J32组，分别用含终浓度0.0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L-1 J32的培养基培养。采用细胞划痕试验检测细胞迁移能力，单克隆形成试验检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况、细胞中活性氧水平及细胞周期，磷酸化H2组蛋白家族成员X(γ-H2AX)免疫荧光法检测细胞DNA损伤程度，Western blot法检测共济失调毛细血管扩张和Rad3相关蛋白(ATR)-细胞周期检查点激酶1(Chk1)-p53-细胞周期素D1(Cyclin D1)通路相关蛋白以及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达。结果 培养24、48 h时，1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组、4.0μmol·L-1 J32组细胞的迁移能力显著低于对照组(P<0.05),2.0μmol·L-1 J32组、4.0μmol·L-1 J32组细胞的迁移能力均显著低于1.0μmol·L-1 J32组(P<0.05),4.0μmol·L-1 J32组细胞的迁移能力显著低于2.0μmol·L-1 J32组(P<0.05)。0.5μmol·L-1 J32组、1.0μmol·L-1 J32组细胞的增殖能力显著低于对照组(P<0.05),1.0μmol·L-1 J32组细胞的增殖能力显著低于0.5μmol·L-1 J32组(P<0.05)。1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组、 4.0μmol·L-1 J32组细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.05),2.0μmol·L-1 J32组、 4.0μmol·L-1 J32组细胞的凋亡率显著高于1.0μmol·L-1 J32组(P<0.05),4.0μmol·L-1 J32组细胞的凋亡率显著高于2.0μmol·L-1 J32组(P<0.05)。1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组、 4.0μmol·L-1 J32组细胞的活性氧水平显著高于对照组(P<0.05),2.0μmol·L-1 J32组、4.0μmol·L-1 J32组细胞的活性氧水平显著高于1.0μmol·L-1 J32组(P<0.05),4.0μmol·L-1 J32组细胞的活性氧水平显著高于2.0μmol·L-1 J32组(P<0.05)。1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组细胞的DNA损伤程度显著高于对照组(P<0.05),2.0μmol·L-1 J32组细胞的DNA损伤程度显著高于1.0μmol·L-1 J32组(P<0.05)。1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组细胞中G1/S期细胞占比显著高于对照组(P<0.05),2.0μmol·L-1 J32组细胞中G1/S期细胞占比显著高于1.0μmol·L-1 J32组(P<0.05)。对照组、1.0μmol·L-1 J32组、2.0μmol·L-1 J32组、4.0μmol·L-1 J32组细胞中，随着J32浓度的增加，磷酸化ATR/ATR值及磷酸化p53蛋白表达呈升高趋势(F=25.534、3.970,P<0.05),Chk1、CyclinD1蛋白表达呈降低趋势(F=19.532、0.485,P<0.05);促凋亡蛋白caspase-3、Bax的表达呈升高趋势(F=0.219、4.314,P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达呈下降趋势(F=0.324,P<0.05)。结论 对映-贝壳杉烯型二萜类化合物J32可呈浓度依赖性地抑制胰腺癌SW1990细胞的迁移和增殖、促进细胞凋亡及提高细胞内活性氧水平，此外，J32可促进细胞发生DNA损伤及细胞周期阻滞，其作用机制可能与ATR-Chk1-p53-Cyclin D1通路相关。

• 单位
  郑州大学; 新乡医学院第一附属医院