基质细胞衍生因子-1促进毛囊角质细胞增殖的研究

作者：张静; 李炳辉; 郑洁; 王知; 李恭驰; 冯自波; 邹利军; 周云华; 杜烨; 杨鸿^*

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(04): 642-645.

• 毛囊角质细胞
• 基质细胞衍生因子-1
• 细胞增殖

目的观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对体外培养的大鼠毛囊角质细胞增殖的影响。方法 2019年6月至2020年1月, 采用免疫荧光检测大鼠毛囊角质细胞(购自中国赛百慷生物有限公司)标志物角蛋白14(K14)的表达量。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测0、5、10、25、50 μg/L浓度SDF-1作用大鼠毛囊角质细胞24 h后, 10、25 μg/L浓度SDF-1作用大鼠毛囊角质细胞48 h后, 及10、25 μg/L浓度SDF-1加入50 nmol/L趋化因子受体-4(CXCR4)拮抗剂普乐沙福(AMD3100)作用大鼠毛囊角质细胞24 h后毛囊角质细胞增殖;5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)标记法分别检测对照组(0 μg/L SDF-1), 25 μg/L SDF-1组, 25 μg/L SDF-1+50 nmol/L AMD3100组作用大鼠毛囊角质细胞24 h后毛囊角质细胞增殖。组间比较采用t检验。结果细胞免疫荧光显示95%以上细胞K14染色呈阳性。CCK-8检测结果显示与0 μg/L浓度SDF-1(103.04±0.99)比较5 μg/L浓度SDF-1对细胞增殖活性无明显影响(100.67±4.59, t=0.905, P>0.05), 差异无统计学意义, 10、25、50 μg/L浓度SDF-1促进毛囊角质细胞增殖(111.44±4.95、124.59±2.08、125.11±0.48, t10=3.221, P10<0.05;t25=8.624, P25<0.01;t50=8.464, P50<0.01), 差异有统计学意义。与浓度为25 μg/L比较, SDF-1浓度为10 μg/L促增殖作用减弱(t=5.043, P<0.01), 差异有统计学意义, 浓度为50 μg/L促增殖作用无明显变化(t=0.199, P>0.05), 差异无统计学意义。10、25 μg/L浓度的SDF-1作用48 h(98.26±5.24、112.39±2.30)与作用24 h(111.44±4.95、124.59±2.08)比较其促增殖作用减弱(t10=3.167, P10<0.05;t25=6.816, P25<0.01), 差异有统计学意义。10、25 μg/L浓度SDF-1加入50 nmol/L AMD3100作用毛囊角质细胞24 h后, 毛囊角质细胞增殖明显受到抑制(84.20±1.06、98.51±0.92, t10=9.325, P10<0.01;t25=19.900, P25<0.01), 差异有统计学意义。EdU检测结果进一步验证SDF-1具有促进毛囊角质细胞增殖作用(SDF-1组:38.59±0.33, 对照组:22.45±2.59, t=10.700, P<0.01), AMD3100可抑制SDF-1促增殖作用(22.12±1.96, t=10.700, P<0.01), 差异有统计学意义。结论 SDF-1在10～50 μg/L浓度范围内对体外培养的大鼠毛囊角质细胞有促进增殖作用, 且该增殖作用能被AMD3100抑制。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 华中科技大学同济医学院附属梨园医院