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摘要
为了明确NtJAZ1基因对烟碱含量（质量分数）和烟株生长发育及品质的影响，以烤烟品种K326为材料，利用CRISPR/Cas9技术对NtJAZ1基因进行敲除，获得了纯合突变株系NK-9。测序结果表明，NtJAZ1-1在1 587～1 641 bp之间大片段缺失，NtJAZ1-2在1 547～1 548 bp之间缺失了2个碱基，导致翻译提前终止。RT-PCR检测结果表明，NK-9烟碱生物合成关键基因NtMYC2a、NtMYC2b、NtPMT和NtQPT的表达水平显著提高。田间调查发现，NK-9株系生长发育正常，株高、叶数和叶宽显著高于对照K326，但叶长显著低于K326。显微观察表明，NK-9叶面腺毛密度较对照有所降低。对现蕾期、打顶期和成熟期烟碱含量检测发现，NK-9株系中部叶的烟碱含量分别比对照提高33.26%、36.41%和39.28%。烤后烟叶化学成分分析表明，NK-9常规化学成分比例协调，烟碱含量较对照提高44.91%；中性香气成分中新植二烯、类胡萝卜素类降解产物含量明显增加，但棕色化反应产物、苯丙氨酸类降解产物和茄酮含量有所降低。说明敲除NtJAZ1基因能够有效提高烟叶烟碱含量，对腺毛发育和叶面化学成分的积累也有一定影响。
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