二甲基甲酰胺诱导H9c2心肌细胞凋亡机制研究

作者：荣青秀; 杨永坚; 张婉婉; 王娟; 马晓丽; 向梅; 王璐璐; 孙文静

来源：中华劳动卫生职业病杂志, 2017, 35(02): 106-110.

• 二甲基甲酰胺
• H9c2心肌细胞
• 细胞凋亡
• NF-κB
• 线粒体

目的观察二甲基甲酰胺(DMF)致H9c2心肌细胞凋亡过程中核因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白胞质p65蛋白、核内p65蛋白、磷酸化核因子-κB抑制(p-IκB)蛋白以及线粒体通路相关蛋白胞质细胞色素C(Cyt-c)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)水平的变化,探讨DMF引起H9c2心肌细胞凋亡的可能机制。方法给予体外培养的H9c2心肌细胞200mmol/L DMF染毒,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测染毒0、2、4、6、8、12 h后胞质p65、核内p65、p-IκB的蛋白表达水平以及染毒0、2、4、8、12、24 h后胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2的蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学(IFC)法对染毒不同时间后的细胞内Cyt-c进行定位。结果各组胞质p65、核内p65、p-IκB蛋白表达水平组间差异均有统计学意义(F=7.79、33.11、90.25,均P<0.01);与对照组比较,2、4、6 h染毒组胞质p65蛋白表达水平均降低,2、4、6、8 h染毒组核内p65蛋白表达水平均升高,2、4、6 h染毒组p-IκB蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。各组胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2蛋白表达水平组间差异均有统计学意义(F=51.42、503.68、73.37,均P<0.01);与对照组比较,8、12 h染毒组Cyt-c蛋白表达水平均升高,2、4、8、12、24 h染毒组Cleaved caspase-3蛋白表达水平均升高、Bcl-2蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(均P<0.01)。IFC法对细胞内Cyt-c检测显示,随着DMF染毒时间的延长,Cyt-c逐渐从线粒体释放到胞质内。结论 NF-κB信号通路与线粒体通路可能参与了DMF诱导的H9c2心肌细胞凋亡。

• 单位
  公共卫生学院; 安徽医科大学第一附属医院; 安徽医科大学