一种靶向HER2嵌合抗原受体CAR THP-1细胞系的构建

作者:陈义昭; 刘丽华; 朱向玲; 王卉卉; 吴旭铭; 檀学文; 方亦龙; 蒋海峰; 许振; 魏伟*; 涂佳杰*
来源:安徽医科大学学报, 2023, 58(03): 352-357.
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.03.002

摘要

目的 获得稳定转染靶向人类表皮生长因子2(HER2)的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)。方法 构建靶向HER2的CAR慢病毒载体并感染人单核细胞白血病细胞系(THP-1)。通过分选流式细胞仪分选出含有绿色荧光标记的CAR THP-1细胞并在体外继续培养。将此靶向HER2的CAR THP-1细胞与HER2表达阴性(-)及阳性(+)的子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别共培养,通过成像流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬,通过流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬比例。结果 CAR慢病毒感染THP-1细胞效率较低;与癌细胞共培养后,流式细胞术及成像流式细胞术结果显示,CAR THP-1组与空载体组相比,CAR THP-1细胞对HER2阳性的Ishikawa细胞吞噬能力增强(P<0.01)。结论 通过构建CAR慢病毒载体并转染THP-1细胞,成功建立了靶向HER2的CAR THP-1细胞系,且其能通过特异性靶向吞噬HER2阳性Ishikawa细胞。

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