胸腺五肽的酶法聚乙二醇定点修饰及其初步药学性质研究

作者：吴云飞; 刘纯慧^*; 张晶晶; 唐凤琰

来源：药物生物技术, 2019, 26(04): 283-288.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.20190401

• 胸腺五肽
• 聚乙二醇
• 微生物转谷氨酰胺酶
• 酶法修饰
• 半衰期
• 体外活性

拟利用微生物转谷氨酰胺酶(m TGase)催化法对胸腺五肽(TP5)进行聚乙二醇(PEG)定点修饰,并初步测定修饰产物的半衰期与生物活性。m TGase的底物苄氧羰基-L-谷氨酰胺酰甘氨酸(ZQG)的末端羧基经碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)活化,然后与叔丁氧羰基-聚乙二醇氨(BOC-PEG-NH2)的氨基相连得到含酰胺供体的PEG-ZQG;经m TGase催化,PEG-ZQG的酰胺基与TP5共价缀合,采用Superdex30凝胶过滤柱层析纯化得到结合物,并对其进行紫外扫描、1H NMR分析;最后测定结合物在小鼠体内的药代动力学特性和体外促脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,1H NMR显示TP5与PEG-ZQG以1∶1成功结合,修饰位点为赖氨酸残基的侧链氨基,产率达78. 5%;修饰产物PEG-ZQG-TP5在小鼠体内的消除半衰期、曲线下面积分别是TP5的5. 9倍、4. 8倍,其对小鼠脾淋巴细胞促增殖能力与TP5相当。因此,基于m TGase催化策略能够实现对TP5的高效定点修饰,产物的体内半衰期明显延长、生物利用度显著提高,且活性保持率高。