体外17-AAG对人RPE细胞VEGF及其受体的影响

作者：姚家奇; 刘庆淮; 刘肖艺; 许志洋; 李建民

来源：国际眼科杂志, 2009, 9(05): 833-835.

• 实时荧光定量PCR
• 17-AAG
• 视网膜色素上皮细胞
• 热休克蛋白90
• VEGF

目的:体外观察17-AAG对人RPE细胞中VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2基因表达的调控。方法:体外培养人RPE细胞株加入17-AAG并作用不同浓度及时间梯度后,收集细胞,抽提RNA进行反转录。同时根据VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2的基因序列,设计相应的引物,进行RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳用于分析引物的特异性,再利用ABI7300PCR仪和SYBRGreen,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct进行基因表达的相对定量分析。结果:17-AAG可以下调VEGFA,VEGFB和VEGFR1基因的表达,而VEGFR2只有再高浓度17-AAG作用时才下调。结论:17-AAG可抑制RPE细胞VEGF及其受体基因。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院; 南京医科大学