摘要
背景:研究报道大蒜素具有抗纤维化作用,可抑制过度增生的成纤维细胞增殖和胶原合成能力,但大蒜素抑制成纤维细胞增殖及诱导其凋亡的确切机制尚未明确。目的:探讨大蒜素抑制硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的作用机制,为防治硬膜外粘连提供新思路。方法:培养人体硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞至对数增长期,用不同质量浓度梯度大蒜素处理24 h。采用荧光显微镜观察细胞形态,CCK-8试验检测细胞增殖,划痕试验及Transwell试验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot及实时定量PCR技术检测细胞增殖、凋亡相关蛋白和基因表达水平。结果与结论:(1)大蒜素处理24 h后,成纤维细胞萎缩变形,体积变小,细胞核固缩、碎裂;(2)细胞增殖能力和迁移率均呈剂量依赖性下降(P <0.01);(3)G1期细胞比例呈剂量依赖性升高(P <0.01),而S期和G2期呈剂量依赖性下降(P <0.01),流式细胞仪结果显示凋亡细胞比例呈剂量依赖性升高(P <0.01);(4)与对照组(未加入大蒜素处理组)相比,细胞核增殖抗原及Bcl-2在蛋白与m RNA水平的表达均显著降低(P <0.01),而Bax表达显著增高(P <0.01);(5)说明大蒜素具有抑制硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞增殖、迁移并促其凋亡的作用,可能与调控细胞核增殖抗原、Bcl-2及Bax表达有关。
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单位苏北人民医院; 扬州大学