微小RNA-384通过调节己糖激酶2抑制人肝癌细胞的增殖

作者：杨冰琦; 李永章^*; 连建伦; 艾宁

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(02).

• 肝癌
• 微小RNA
• 增殖
• 己糖激酶2

目的探讨在人肝癌细胞中微小RNA(microRNA, miR)-384对己糖激酶2(HK2)的调节机制。方法应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测43例肝癌组织及癌旁组织中miR-384和HK2基因的表达水平, 分为肝癌组织组及癌旁组织组;利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-384与HK2 3’端非编码区(3’UTR)的具体结合位点, 分为miR-384模拟物(mimics)组, 空白对照(NC)组和HK2短发夹核糖核酸(shRNA)组;利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验观察miR-384和HK2对肝癌细胞HepG2(购自中国科学院上海细胞库)增殖能力的影响;采用挽救实验进一步验证HK2基因是否可以逆转miR-384对HepG2细胞增殖的调控作用。两样本均数间比较采用t检验。结果肝癌组miR-384表达水平低于癌旁组织组(0.42±0.07比1.11±0.06, t=18.210, P<0.01), 差异有统计学意义, 肝癌组HK2含量高于癌旁组织组(2.02±0.15比1.51±0.13, t=13.320, P<0.01), 差异有统计学意义;miR-384 mimics与HK2 3’UTR-wt共转染组荧光素酶活性低于对照组(0.34±0.03比0.21±0.01, t=12.140, P<0.05), 差异有统计学意义。而miR-384 mimics与HK2-3’UTR-mut共转染组荧光素酶活与对照组比较, 差异无统计学意义(0.22±0.03比0.21±0.01, t=1.140, P> 0.05)。转染miR-384 mimics组HK2的mRNA表达水平低于对照组(1.62±0.17比2.11±0.12, t=6.304, P<0.01), 差异有统计学意义。CCK-8实验分析结果显示, miR-384 mimics组HepG2细胞的增殖能力低于对照组(0.82±0.07比1.31±0.11,t=2.941, P<0.01), 差异有统计学意义。同样, HK2 shRNA组HepG2细胞的增殖能力也低于对照组(0.85±0.07比1.32±0.11, t=2.424, P<0.01), 差异有统计学意义。miR-384 mimics和HK2过表达质粒共转染组HepG2细胞的增殖能力与NC组比较, 差异无统计学意义(1.32±0.02比1.32±0.14,t=1.040, P>0.05)。结论 miR-384可通过靶向调控HK2的表达, 抑制HepG2细胞的增殖能力。

• 单位
  河北省中医院; 河北医科大学第四医院