NaAsO2对L-02肝细胞氧化应激性损伤及SOD1、AUF1表达影响

作者:胡倩; 时明阳; 毕顶念; 李娇; 吕莹; 段恬筱; 付雨; 张爱华; 胡勇*
来源:现代预防医学, 2020, 47(23): 4321-4325.

摘要

目的观察不同剂量亚砷酸钠(NaAsO2)对L-02肝细胞氧化应激性损伤作用及超氧化物歧化酶1(SOD1)、AU碱基富集元件RNA结合因子1(AUF1)表达影响。方法用0、10、20、40μmol/L NaAsO2分别处理L-02肝细胞24小时,化学比色法检测谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活力及总胆汁酸(TBA)含量和SOD1、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性;荧光探针2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯检测细胞内活性氧族(ROS)相对荧光密度;实时荧光定量PCR和Western Blotting分别检测SOD1和AUF1转录和蛋白表达。结果 (1)与对照组比较,20、40μmol/L NaAsO2组GST活性和TBA含量均升高(P<0.05);10、20、40μmol/L NaAsO2组γ-GT活性也升高(P<0.05)。(2)与对照组比较,20、40μmol/L NaAsO2组SOD1活性均下降(P<0.05);GPx活性仅在10μmol/L升高(P<0.05);细胞内ROS先降低后升高(P<0.05)。(3)与对照组比较,20和40μmol/L NaAsO2组AUF1和SOD1 mRNA表达均升高(P<0.05),AUF1蛋白表达先升高后降低(P<0.05);10、20μmol/L NaAsO2组SOD1蛋白表达升高(P<0.05),但40μmol/L NaAsO2组SOD1蛋白表达有降低趋势。结论 NaAsO2对L-02肝细胞产生氧化应激性损伤,其机制可能是NaAsO2通过降低AUF1的蛋白表达降低,从转录后调控降低了SOD1 mRNA的稳定性而使其蛋白表达和酶活力降低。