新型神经营养因子TAT—BDNF生物合成及生物活性研究

作者：蒋晖; 金大地; 鲁凯伍; 金卫林; 鞠躬

来源：中国临床解剖学杂志, 2006, (03): 325-328.

• 蛋白转导
• 脑源性神经营养因子
• 中枢神经损伤
• 融合蛋白 protein transduction
• BDNF
• central nerver injury
• fusion protein

目的:合成新型神经营养因子TAT-BDNF并验证其生物活性,为进一步应用功能蛋白质治疗中枢神经损伤提供研究方法。方法:采用分子克隆方法构建带有TAT蛋白转导区序列及无信号肽序列人BDNF基因的原核表达载体pTAT-HA-BDNF。经原核表达系统表达、纯化、复性获得纯净TAT-BDNF融合蛋白。利用体外培养的新生大鼠小脑颗粒细胞,通过双重免疫荧光细胞染色检测其蛋白转导活性;Hoechst33342染色观察TAT-BDNF对颗粒细胞谷氨酸兴奋性毒性损伤神经保护作用。结果:重组质粒能有效的通过原核表达系统表达并获得高纯度TAT-BDNF。免疫荧光细胞染色显示TAT-BDNF能快速转导入小脑颗粒细胞中...

• 单位
  第四军医大学; 南方医科大学