基于线粒体自噬研究补肝散对衰老大鼠肝脏损伤的影响

作者：张月; 白德高; 霍冉; 王杰鹏; 方芳; 方朝义^*; 王少贤^*

来源：中华中医药杂志, 2023, 38(03): 1039-1045.

• 衰老
• 线粒体自噬
• 肝脏损伤
• 肝气亏虚
• 补肝散
• D-半乳糖

目的：基于肝气虚理论和线粒体自噬探讨衰老机制，观察补肝散对衰老大鼠肝脏损伤的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠32只，随机分为空白组、模型组、补肝散组、雷帕霉素组，每组8只。除空白组腹腔注射0.9%氯化钠溶液（10 mL/kg）外，其余各组均腹腔注射D-半乳糖溶液（D-gal,400 mg/kg），复制衰老大鼠模型。造模同时，补肝散组灌服补肝散煎液（14.06 g/kg），雷帕霉素组灌服雷帕霉素溶液（1 mg/kg），空白组和模型组灌服等量0.9%氯化钠溶液，连续56 d。测定各组大鼠体质量、抓力，血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）含量。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学变化；RT-qPCR检测线粒体融合蛋白（Mfn）1、Mfn2、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62 mRNA表达水平；免疫组化染色（ABC法）检测Beclin1、p62蛋白表达；Western Blot测定Mfn1、Mfn2、LC3蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠出现肝细胞水肿，肝血窦受挤压变窄，轻度脂肪变性及少量肝细胞坏死，另可见肝细胞嗜酸性病变及凋亡的肝细胞；体质量和抓力显著降低（P<0.05）；血清MDA含量升高（P<0.05）,SOD活性降低（P<0.05）,ALT、AST、ALP含量升高（P<0.05）；肝组织中Mfn1、Mfn2、p62 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）,Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）。与模型组比较，补肝散组大鼠肝细胞水肿减轻，脂肪变性减少，嗜酸性病变及凋亡的肝细胞明显减少；体质量和抓力显著升高（P<0.05）；血清MDA含量降低（P<0.05）,SOD活性升高（P<0.05）,ALT、AST、ALP含量降低（P<0.05）；肝组织中Mfn1、Mfn2、p62mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）,Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：衰老大鼠肝脏损伤与线粒体自噬功能下降关系密切，可作为肝虚致衰的重要机制；补肝散可通过提高肝脏线粒体自噬水平，减缓衰老大鼠肝脏损伤程度。

• 单位
  河北中医学院