奥沙利铂通过内质网应激PERK-eIF2α-ATF4通路诱导口腔鳞癌HSC-3细胞凋亡发生的研究

作者：李惠如; 杨治鑫; 高子媛; 郑翔; 耿娜娜^*

来源：遵义医科大学学报, 2023, 46(01): 30-43.

DOI：10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2023.0002

• 奥沙利铂
• 口腔鳞癌
• 内质网应激
• PERK-eIF2α-ATF4通路

目的 研究奥沙利铂对口腔鳞癌HSC-3细胞的杀伤作用及ERS中PERK-eIF2α-ATF4通路的影响。方法 CCK8检测不同浓度奥沙利铂对HSC-3细胞增殖的影响；DAPI染色和Annexin V/PI双染法检测奥沙利铂对HSC-3细胞凋亡诱导情况；RT-qPCR和Western blotting分别检测奥沙利铂激活HSC-3细胞中内质网应激及PERK-eIF2α-ATF4通路相关基因和蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示，不同浓度的(10、20、30、40、50 mg/L)奥沙利铂对HSC-3细胞生长增殖具有抑制作用，且呈一定的剂量依赖性，其中半数有效浓度为40 mg/L。DAPI染色和Annexin V/PI双染法结果证明不同浓度(20、40、80 mg/L)奥沙利铂对HSC-3细胞具有促进凋亡的作用；与对照组相比，奥沙利铂组细胞核染色质固缩加重，形成更多的核碎裂片段和凋亡小体，表明凋亡进一步加重。RT-qPCR及Western blot结果显示奥沙利铂促进内质网应激标志性分子GRP78、CHOP及信号通路PERK-eIF2α-ATF4的标志性分子PERK、eIF2α、ATF4表达的上调，同时促进PERK磷酸化水平和Caspase 3发生剪切激活，最终诱导细胞凋亡的发生。结论 本研究明确了奥沙利铂在体外具有杀伤口腔鳞癌HSC-3细胞的作用，其分子机制之一可能是通过内质网应激途径及其PERK-eIF2α-ATF4信号通路的激活实现药物对细胞的抑制作用，此研究结果为临床上治疗口腔鳞癌提供了一定的理论基础和依据。

• 单位
  基础医学院; 遵义医科大学