CircECH1通过充当miR-365-5p海绵抑制猪前体脂肪细胞增殖（英文）

作者：李娇; 赵天枝; 王婕妤; 李萌; 安家岐; 杨阳; 高鹏飞; 曹果清; 郭晓红^*; 李步高^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2023, 39(05): 672-682.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2023.04.1061

• 猪
• 猪环状RNA ECH1(circECH1)
• miR-365-5p
• 前体脂肪细胞
• 细胞增殖

环状RNA (circRNA)是一种共价封闭RNA,在脂肪发育过程中具有重要作用。本研究旨在探讨猪环状RNA ECH1 (circECH1)对前体脂肪细胞增殖的调控机制。本研究通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析、Sanger测序和RNase R酶消化法成功鉴定circECH1的稳定环状结构，其在马身猪各个组织中均有表达，并且其在脂肪组织中的表达量随日龄增加呈上升趋势。功能研究证明，干扰circECH1后，增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67极显著升高(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01)。为进一步探究其分子机制，使用miRDB、miRWalk和RNAhybrid预测circECH1的下游靶基因。通过双荧光素酶报告基因分析和RNA结合蛋白免疫沉淀技术，验证circECH1能靶向结合miR-365-5p。在猪前体脂肪细胞中过表达miR-365-5p会增殖相关基因PCNA和CDK1的表达量极显著升高(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01);干扰miR-365-5p后增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67的表达量极显著降低(P<0.01),增殖细胞数量极显著增加(P<0.01)。挽救实验结果显示，共转染si-circECH1和miR-365-5p inhibitor与单独转染miR-365-5p inhibitor相比，增殖相关基因PCNA、CDK1和MKi67的表达量显著升高(P<0.01),增殖细胞数量显著升高。本研究结果证明，circECH1存在于马身猪的脂肪组织中，并且通过海绵吸附miR-365-5p调控猪前体脂肪细胞增殖，为进一步了解调控猪前体脂肪细胞的分子机制提供理论依据。

• 单位
  山西农业大学; 动物科学学院