枇杷叶提取物通过激活磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路减轻脂多糖诱导的肺细胞损伤

作者：陈宝磊; 高映春; 吴磊

来源：安徽医药, 2022, 26(03): 453-457.

• 急性肺损伤
• 枇杷叶提取物
• 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
• 脂多糖
• A549细胞
• 增殖
• 凋亡

目的 探讨枇杷叶提取物对脂多糖（LPS）诱导的人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549增殖、凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法 2019年6月至2020年7月，采用LPS诱导的A549细胞建立肺损伤模型（LPS组），同时将正常培养的细胞作为对照组。不同剂量（1 mg/L、2 mg/L、4 mg/L）的枇杷叶提取物处理细胞（LPS+枇杷叶-L组、LPS+枇杷叶-M组、LPS+枇杷叶-H组），添加磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)信号通路抑制剂LY294002与枇杷叶提取物处理细胞（LPS+枇杷叶-H+LY294002组）；采用MTT法检测细胞增殖；采用流式细胞术检测细胞凋亡率；采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶（LDH）的含量；采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）的含量；采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛的含量；蛋白质印迹法（Western blotting）检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白蛋白表达量。结果 与对照组比较，LPS组吸光度[（1.38±0.06）比（0.55±0.02）]及SOD的含量[（81.66±5.36）U/L比（14.65±1.06）U/L]降低，凋亡率[（6.41±0.25）%比（27.43±1.00）%]、Bax蛋白水平及LDH[(242.86±6.09)U/L比（875.92±15.01）U/L]、丙二醛[（121.55±3.17）μmol/g比（424.46±6.48）μmol/g]的含量升高，Bcl-2、p-PI3K[(0.60±0.04)比（0.13±0.01）]、p-Akt[(0.51±0.04)比（0.09±0.01）]蛋白水平降低，差异有统计学意义（P<0.05）；与LPS组比较，LPS+枇杷叶-M组、LPS+枇杷叶-H组吸光度[（0.55±0.02）比（0.86±0.03）、（1.18±0.05）]及SOD[(14.65±1.06)U/L比（36.84±2.08）U/L、（70.97±3.03）U/L]的含量升高，凋亡率[（27.43±1.00）%比（22.24±0.81）%、（14.78±0.49）%]、Bax蛋白水平及LDH[(875.92±15.01)U/L比（641.95±9.81）U/L、（365.47±7.02）U/L]、丙二醛[（424.46±6.48）μmol/g比（277.94±6.90）μmol/g、（156.30±3.26）μmol/g]的含量降低，Bcl-2、p-PI3K[(0.13±0.01)比（0.32±0.01）、（0.54±0.03）]、p-Akt[(0.09±0.01)比（0.25±0.02）、（0.42±0.03）]蛋白水平升高，均差异有统计学意义（P<0.05）；添加LY294002可明显逆转枇杷叶提取物对LPS诱导的A549细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论 枇杷叶提取物可通过激活PI3K/Akt信号通路减轻LPS诱导的A549细胞增殖抑制、凋亡和氧化应激效应，为探究枇杷叶治疗细菌感染引起的急性肺损伤提供依据。

• 单位
  辽阳市中心医院