5-磷酸核糖醇转移酶fukutin抑制HeLa细胞中α-dystroglycan的分泌

作者:周恒; 乔兵; 李彩红; 李强; 朱昉修*; 范礼斌*
来源:安徽医科大学学报, 2022, 57(10): 1640-1645.
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.10.023

摘要

目的 探究5-磷酸核糖醇转移酶fukutin(FKTN)对HeLa细胞周期、凋亡、迁移以及α抗肌萎缩相关糖蛋白(α-DG)分泌的影响。方法 构建质粒pcDNA3.1-α-DAG-HA,将pcDNA3.1-FKTN-3xFlag转染至HeLa细胞,提取总蛋白,Western blot法检测FKTN的过表达;过表达FKTN后利用流式细胞术检测细胞周期、凋亡情况;过表达FKTN后,采用细胞划痕实验检测细胞迁移速率,使用麦胚凝集素琼脂糖珠(WGA-agarose)富集培养液中的α-DG,然后进行Western blot检测。结果 成功构建pcDNA3.1-α-DAG-HA真核表达质粒;FKTN在HeLa细胞中可过表达;过表达FKTN后与对照组相比,实验组细胞周期S期百分比下降(P<0.001),细胞凋亡率无变化(P>0.05);过表达FKTN后与对照组相比,实验组细胞迁移速率无变化(P>0.05),α-DG分泌量减少。结论 过表达FKTN阻滞HeLa细胞周期,抑制α-DG分泌,但对细胞凋亡、迁移无影响。

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