α_2-肾上腺素能受体在水杨酸钠诱导大鼠耳蜗螺旋神经节神经元兴奋毒性中的表达变化

作者：易健启; 林晓宇; 刘金兰; 陈慧英; 祝小婷; 叶莞丽; 黄佳琳; 李睿琳; 苏纪平

来源：听力学及言语疾病杂志, 2022, 1-6.

• α_2肾上腺素能受体
• 亚型
• 水杨酸钠
• 螺旋神经节神经元
• 兴奋毒性

目的 观察α_2-肾上腺素能受体(α_2-adrenergic receptor,α_2-AR)在大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(spiral ganglion neuron,SGN)中的分布,以及水杨酸钠(sodium salicylate,SS)作用SGN不同时间点后α_2-AR各亚型的表达改变,以探讨其在SGN兴奋毒性中的作用。方法 将新生SD大鼠随机分成:对照组、SS处理6h组、SS处理12h组和SS处理24 h组,每组2只。急性分离各组SGN后进行原代培养48 h,对照组用新的培养基培养,不做处理,余三组分别用5 mmol/L水杨酸钠处理6 h、12 h、24 h,用免疫荧光染色技术检测SGN中α_2-AR各亚型的表达情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot方法检测SS作用不同时间后α_2-AR各亚型的mRNA和总蛋白表达改变情况。结果(1)免疫荧光染色表明SGN上存在α_(2A)-AR、α_(2B)-AR、α_(2C)-AR三种亚型的表达;(2)RTqPCR结果显示在SGN中α_2-AR各亚型mRNA相对表达量α_(2A)-AR>α_(2B)-AR(P<0.01),α_(2A)-AR>α_(2C)-AR(P<0.01),α_(2B)-AR和α_(2C)-AR之间差异无统计学意义;与对照组相比,5 mmol/L SS作用SGN 6h、12 h、24 h后α_(2A)-AR表达量均明显增高(P<0.05);SS作用12 h后α_(2C)-AR表达量开始增高(P<0.05),而α_(2B)-AR呈升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);(3)Western blot结果显示SGN中α_2-AR各亚型蛋白表达量α_(2A)-AR>α_(2B)-AR(P<0.01),α_(2A)-AR>α_(2C)-AR(P<0.05),α_(2B)-AR和α_(2C)-AR之间差异无统计学意义,与mRNA表达一致。与对照组相比,5mmol/L SS作用SGN 12 h后α_(2A)-AR总蛋白开始下降(P<0.05),作用24 h后α_(2C)-AR总蛋白下降(P<0.05),α_(2B)-AR总蛋白不变。结论 α_2-AR三种亚型在SGN中均有表达,其中α_(2A)-AR、α_(2C)-AR可能介导了SS诱导的SGN兴奋毒性且α_(2A)-AR比α_(2C)-AR反应更快速。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院; 广西中医药大学