猪IL-21的真核表达及其与CD40L共刺激抗体分泌的活性研究

作者：杨贝贝; 符芳; 薛美; 冯力; 刘平黄^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(05): 501-533.

• 猪IL-21
• 真核表达
• 蛋白纯化
• 抗体分泌

为研究猪白介素21 (IL-21)的生物学功能,本研究在猪IL-21基因(456 bp)的3’端加上猪Ig G Fc标签序列后,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建重组质粒pcDNA-IL-21-Fc。将该重组质粒转染293T细胞瞬时表达后,利用protein A亲和纯化介质纯化转染上清中的目的蛋白,并检测其纯度与生物学活性。结果显示,构建的重组质粒pcDNA-IL-21-Fc能够在293T细胞中表达相对分子量约为44 ku的猪IL-21融合蛋白;亲和纯化后的猪IL-21融合蛋白能够与CD40L协同呈剂量依懒性地刺激猪外周血淋巴细胞(PBMCs)分泌Ig G。本研究为进一步探究猪IL-21在适应性免疫应答中的作用提供依据。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室