日本血吸虫22.6kDa膜相关蛋白Th1型表位的免疫学鉴定

作者：王慧; 陶方方; 孙新娟; 刘丰; 王勇; 苏川; 吴海玮; 张兆松

来源：中国血吸虫病防治杂志, 2009, 21(01): 11-14.

DOI：10.16250/j.32.1374.2009.01.007

• 日本血吸虫
• 22.6kDa膜蛋白
• Th1型表位
• 免疫学鉴定

目的鉴定日本血吸虫22.6 kDa膜蛋白(Sj22.6)的Th1型表位,为构建短肽疫苗奠定基础。方法采用合成肽Sj22.6-P4、无关肽(对照)及PBS免疫C57BL/6小鼠2次(间隔7 d),末次免疫后7~10 d取脾分离单个核细胞,用合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS刺激培养,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞的增殖效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其细胞培养上清中IFNγ-、IL-4及IL-2水平。运用流式细胞技术三色标记法检测经合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS免疫2次的C57BL/6小鼠脾淋巴细胞内的Th1、Th2细胞因子。结果合成肽Sj22.6-P4可刺激经该抗原肽免疫2次的C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖,与PBS组相比,增殖指数(SI)均>2。与无关肽对照组相比,细胞培养上清中IL-2、IFN-γ分泌水平增高,其中IL-2分泌水平差异有统计学意义(P<0.05),IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),而IL-4分泌水平明显降低(P<0.05)。合成肽Sj22.6-P4免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞中分泌IFN-γ细胞的百分比显著增高,分泌IL-4细胞的百分比显著降低(P均<0.05)。结论合成肽Sj22.6-P4是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。

• 单位
  南京医科大学; 浙江中医药大学