高表达MYH9通过激活AKT/c-Myc通路抑制非小细胞肺癌细胞凋亡

作者：刘芳; 彭岚竹; 席菁乐

来源：南方医科大学学报, 2023, 43(04): 527-536.

DOI：10.12122/j.issn.1673-4254.2023.04.04

• MYH9
• CRISPR-Cas9
• 非小细胞肺癌
• 细胞凋亡
• 顺铂耐药
• Akt/c-Myc信号通路

目的 探讨肌球蛋白重链9(MYH9)对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、凋亡和对顺铂敏感性的影响并探讨其作用机制。方法 常规培养6株NSCLC细胞系（A549、H1299、H1975、SPCA1、H322、H460）和1株正常支气管上皮细胞系（16HBE）采用Western blot法检测MYH9的表达情况；采用免疫组织化学染色法检测NSCLC患者组织MYH9的表达，实验分为癌组织（49例）和癌旁组织（43例）；常规培养H1299和H1975细胞系，使用CRISPR/Cas9技术构建MYH9敲除的NSCLC细胞系，实验分为sgNC组，sgMYH9组，采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验检测敲除MYH9对肺癌细胞增殖的影响；Western blot实验、细胞凋亡流式细胞术检测MYH9对细胞凋亡的影响；通过IC50法检测敲除MYH9的肺癌细胞对顺铂敏感性的影响，实验分为sgNC组、sgMYH9组；培育小鼠肿瘤异种移植物模型验证MYH9体内生物学功能，实验分为sgNC组、sgMYH9组。结果与癌旁组织相比，MYH9在癌组织中上调（P<0.001），高表达患者具有更短的生存（P=0.023）。敲除MYH9抑制细胞增殖（P<0.001），促进细胞凋亡（P<0.05），增加对顺铂的化学敏感性。此外，MYH9的耗竭显著抑制了体内肿瘤生长（P<0.001）。分子机制表明，敲除MYH9使AKT/c-Myc轴失活（P<0.05），从而抑制BCL-2样蛋白1的表达（P<0.05），促进BH3相互作用结构域死亡激动蛋白和凋亡调节剂BAX的表达（P<0.05），并激活胱天蛋白酶3和胱天蛋白酶9(P<0.05)。结论 MYH9通过AKT/c-Myc轴调节细胞凋亡，从而促进NSCLC进展。

• 单位
  南方医科大学; 南方医科大学南方医院