摘要
为制备高效负载、递送和缓释抗原的新型功能化氧化石墨烯衍生材料(GCF)作为佐剂,探索该纳米佐剂对OVA免疫原性影响。以氧化石墨烯(graphene oxide, GO)为母体,采用EDC/NHS共价嫁接壳聚糖(chitosan, CS),并静电吸附泊洛沙姆407(poloxamer, F127)制备出亲水性的氧化石墨烯衍生材料GO-CS-F127(简称GCF)。利用XRD、UV-vis、FI-IR、Zeta电位等多种方法对GCF进行理化特性表征,确定材料的形貌、成分及电荷分布。通过BCA法检测GCF对OVA的最大吸附量及释放率,CCK-8法鉴定GCF新材料在体外安全性评价,ELSIA方法评价小鼠血清中特异性抗体水平,并采集小鼠重要组织制备切片以观察病理变化。结果显示,GCF呈片层结构,常温放置30 d仍能稳定存放,带有17.9 mV的正电荷,能快速吸附抗原,其最大吸附量能达到1.9 g/g,且对抗原具有显著的缓释作用。GCF质量浓度在100 mg/L以下,细胞存活率达85%以上,且对心、脾、肾等组织无损伤,具有良好的生物相容性。与单独OVA组及PBS组相比,发现GCF能显著提高小鼠OVA特异性IgG抗体水平。结果表明,以功能化氧化石墨烯GCF作为佐剂,可有效提高抗原的免疫原性。
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