二甲双胍预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤时AMPK/PINK1信号通路的影响

作者：马云娜; 和凤; 王福宇; 向瀚民; 周慧敏; 柯剑娟; 王焱林^*

来源：中华麻醉学杂志, 2023, 43(05).

• 二甲双胍
• 糖尿病
• 心肌再灌注损伤
• 蛋白激酶类
• 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶

目的评价二甲双胍预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤时单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)/PTEN诱导假定激酶1(PINK1)信号通路的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠36只, 6周龄, 体质量120～160 g, 采用随机数字表法分为3组(n=12):糖尿病假手术组(DS组)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DI/R组)和糖尿病心肌缺血再灌注+二甲双胍预处理组(DI/R+Met组)。高脂高糖饲料喂养4周后, 通过单次腹腔注射1%链脲佐菌素40 mg/kg制备2型糖尿病模型。采用阻断左冠状动脉前降支30 min, 再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。DI/R+ Met组于心肌缺血前1周给予每天1次二甲双胍200 mg/kg灌胃处理。于再灌注120 min时采集股静脉血样, 采用ELISA法检测血清CK-MB和cTnI浓度;随后处死大鼠取心肌组织, 采用HE染色法观察病理学结果;采用伊文氏蓝和TTC双重染色法确定心肌梗死体积百分比;采用Western blot法检测心肌自噬相关蛋白Beclin-1、PINK1、磷酸化AMPK(p-AMPK)的表达和微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)的比值。结果与DS组比较, DI/R组和DI/R+ Met组心肌梗死体积百分比、血清CK-MB和cTnI浓度升高, 心肌Beclin-1、p-AMPK和PINK1表达上调, LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05), 病理学损伤加重;与DI/R组比较, DI/R+ Met组心肌梗死体积百分比、血清CK-MB和cTnI浓度降低, 心肌Beclin-1、p-AMPK和PINK1表达上调, LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(P<0.05), 病理学损伤减轻。结论二甲双胍预处理减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与激活AMPK/PINK1信号通路上调线粒体自噬水平有关。

• 单位
  武汉大学中南医院