天然水蛭素对人微血管再生作用的初步研究

作者：林冠宇; 林博杰; 朱江英; 潘新元; 殷国前^*

来源：中国修复重建外科杂志, 2018, 32(12): 1586-1591.

• 水蛭素
• 微血管内皮细胞
• 三维培养
• Notch信号通路
• 血管再生

目的研究天然水蛭素对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMVECs)增殖的影响及其诱导血管再生的机制。方法取HMVECs接种至Matrigel基质胶培养24 h,体外建立三维培养模型,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。然后将细胞三维培养模型随机分为不同浓度天然水蛭素培养组(1、4、7 ATU/mL组)以及单纯含10%FBS的DMEM培养基培养组(对照组)。各组细胞三维培养模型加入对应培养基后,培养24、48、72 h采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖情况;培养24 h行成管实验并采用免疫荧光染色法测定细胞VEGF及Notch1表达水平。结果细胞三维培养观察示,HMVECs于基质胶上贴附良好,24 h时完全形成管腔样结构。CCK-8检测示,各时间点1、4 ATU/mL组A值均高于对照组(P<0.05),其中4 ATU/mL组最高;而7 ATU/mL组A值显著低于对照组以及1、4 ATU/mL组(P<0.05)。细胞成管实验示,1、4 ATU/mL组成管数量较对照组及7 ATU/mL组明显增多,且4 ATU/mL组多于1 ATU/mL组,差异有统计学意义(P<0.05);7 ATU/mL组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色示,与对照组比较,1、4 ATU/mL组Notch1表达量增高,7 ATU/mL组降低;其中4、7 ATU/mL组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。1、4、7 ATU/mL组VEGF表达量均较对照组增高,4 ATU/mL组高于1、7 ATU/mL组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低、中浓度天然水蛭素可促进HMVECs增殖使血管再生,高浓度天然水蛭素则对HMVECs增殖及血管再生起抑制作用;其作用机制可能与VEGF-Notch信号通路有关。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院; 广西壮族自治区民族医院