异质性细胞核核糖蛋白A2B1在小鼠小脑发育与人髓母细胞瘤中的表达

作者：赵顺莉; 赵赋; 李晴; 张晶; 张至玮; 李春德; 刘丕楠; 佟伟民; 牛亚梅^*

来源：中华病理学杂志, 2019, 48(09): 694-699.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0529?5807.2019.09.006

• 髓母细胞瘤
• 核糖核蛋白类
• 小脑皮质
• 动物替代试验
• 小鼠, 近交C57BL

目的探讨异质性细胞核核糖蛋白(HNRNP)A2B1在小鼠小脑发育及髓母细胞瘤中的表达模式及意义。方法从数据库查询小鼠小脑及人脑中基因的RNA水平。免疫印迹实验与免疫组织化学实验检测不同年龄C57BL/6野生型小鼠小脑中HNRNPA2B1的蛋白水平。通过免疫组织化学实验检测对照人小脑样本与人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的蛋白水平。m6A-IP-qPCR检测Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA m6A甲基化水平;利用人髓母细胞瘤Daoy细胞检测蛋白酶抑制剂MG132对HNRNPA2B1蛋白丰度的影响。结果小鼠小脑发育期HNRNPA2B1的RNA及总体蛋白水平高于成年小鼠小脑;原位水平上HNRNPA2B1低表达于含有增殖细胞的外颗粒层, 而在浦肯野细胞与分子层细胞中高表达。HNRNPA2B1在髓母细胞瘤中的RNA水平显著高于正常人小脑, 但免疫组织化学染色阳性强度明显降低, 且差异具有统计学意义(P<0.05)。人髓母细胞瘤及Daoy细胞中HNRNPA2B1 RNA上含有m6A修饰;10 μmol/L或20 μmol/L的MG132处理均可引起Daoy细胞中HNRNPA2B1蛋白水平升高。结论 HNRNPA2B1在小鼠小脑发育过程中的表达呈动态变化;与对照组相比, 人髓母细胞瘤中HNRNPA2B1的RNA水平显著上升, 而蛋白水平明显降低, 提示HNRNPA2B1可能与小脑发育及髓母细胞瘤进程相关。HNRNPA2B1 RNA m6A修饰及蛋白的泛素化修饰可能是导致其在髓母细胞瘤中RNA丰度升高而蛋白水平降低的原因。

• 单位
  中国医学科学院; 北京协和医学院; 中国医学科学院基础医学研究所; 首都医科大学附属北京天坛医院