摘要
目的 探讨THUMPD3反义RNA 1(THUMPD3-AS1)通过靶向微小RNA-877(miR-877)调控肝细胞癌(HCC)细胞增殖、迁移和侵袭的潜在机制。方法 采用实时荧光定量PCR检测THUMPD3-AS1在正常肝细胞LO2和HCC细胞(BEL-7404、BEL-7404、Hep3B、Huh-7、SMMC-7721)的表达情况。培养SMMC-7721细胞并分为si-NC组(转染阴性对照序列)、si-THUMPD3-AS1组(转染THUMPD3-AS1干扰序列)、si-THUMPD3-AS1+miR-NC组(转染THUMPD3-AS1干扰序列+miR-877无关序列)和si-THUMPD3-AS1+miR-877 inhibitor组(转染THUMPD3-AS1干扰序列+miR-877抑制物inhibitor)。在线预测结合双荧光素酶报告基因实验验证THUMPD3-AS1和miR-877的靶向关系。采用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验分别评估细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blotting检测磷酸化Janus激酶1(p-JAK1)和磷酸化信号传导及转录激活因子3(p-STAT3)的表达。结果 与LO2细胞相比,HCC细胞的THUMPD3-AS1表达升高而miR-877表达降低(P<0.05)。THUMPD3-AS1能够结合并负调控miR-877表达。与si-NC组相比,si-THUMPD3-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制(P<0.05)。与si-THUMPD3-AS1组相比,si-THUMPD3-AS1+miR-877 inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力增强(P<0.05)。si-THUMPD3-AS1组的p-JAK1和p-STAT3水平低于si-NC组,而si-THUMPD3-AS1+miR-877 inhibitor组的p-JAK1和p-STAT3水平高于si-THUMPD3-AS1组(P<0.05)。结论 THUMPD3-AS1通过海绵化miR-877促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭并激活JAK/STAT信号,成为HCC治疗的潜在靶点。
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单位海南医学院第二附属医院; 海南西部中心医院