摘要
目的 基于Oncomine数据库分析细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因在卵巢癌中的表达水平及沉默其表达对癌细胞生物学行为的影响。方法 利用Oncomine数据库中关于卵巢癌组织中Cyclin D1基因的相关信息,分析Cyclin D1基因在不同肿瘤中的表达情况以及在卵巢癌中的表达情况。使用在线数据库Kaplan-Meier Plotter分析Cyclin D1表达水平与卵巢癌预后的关系。使用qRT-PCR检测各卵巢癌细胞株(SKOV3、CAOV3、A2780、ES2)及正常卵巢上皮细胞中Cyclin D1的表达。取对数生长期卵巢癌细胞SKOV3,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(NC siRNA组)和Cyclin D1基因沉默组(Cyclin D1 siRNA组);使用Western blotting检测各组Cyclin D1蛋白表达;分别使用MTT法、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果 通过挖掘分析Oncomine数据库涉及的Cyclin D1基因发现,与正常卵巢组织比较,在所有差异表达基因中,Cyclin D1基因的中位数值排名为202.0,P<0.001。与Cyclin D1低表达的卵巢癌患者比较,Cyclin D1高表达患者的总生存期和无瘤进展生存期均较短,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常卵巢上皮细胞比较,Cyclin D1基因在各卵巢癌细胞(ES2、CAOV3、SKOV3、A2780)中的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与SKOV3细胞株比较,Cyclin D1基因在CAOV3、A2780、ES2细胞株中的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin D1 siRNA组细胞中Cyclin D1的表达量、增殖能力、迁移面积、穿过聚碳酸酯膜的癌细胞数量均明显低于空白对照组和NC siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Cyclin D1基因在卵巢癌组织中高表达,该基因可能参与卵巢癌的发生发展和转移,并与患者预后密切相关。
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单位中南大学湘雅医学院