G6PD缺陷通过Caspase-3和PARP-1诱导人黑色素瘤细胞凋亡

作者：郝晓培; 任娜; 唐琼玲; 张春华; 胡滔; 陈龙; 朱月春

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2010, 26(12): 1121-1127.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2010.12.015

• 葡糖-6-磷酸脱氢酶
• 黑色素瘤
• 半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)
• 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)
• 细胞凋亡

葡糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在许多肿瘤细胞中高表达,但其发生的作用机理目前仍然不明确.以正常人表皮黑色素细胞(HEM)、野生型人黑色素瘤A375细胞(A375-WT)和G6PD缺陷的A375细胞(A375-G6PDΔ)为对象,经real-time PCR、Western印迹和紫外分光光度法分析显示,A375-WT细胞的mRNA、G6PD蛋白和G6PD活性分别是HEM细胞的1.89倍(P<0.05)、6.86倍(P<0.01)和2.30倍(P<0.05).Annexin V/PI流式细胞仪和Western印迹测定表明,A375-G6PDΔ的凋亡率是A375-WT的5.10倍(P<0.01),活化半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)增高1.84倍(P<0.01)以及89 kD多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)生成增加2.87倍(P<0.01).分光光度法分析显示,A375-G6PDΔ的NADPH和GSH分别降低了72.30%(P<0.01)和27.39%(P<0.05),并伴有75.43%的H2O2增高(P<0.01).结果提示,G6PD在黑色素瘤细胞中高表达和高活性,而敲减G6PD表达通过caspase-3和PARP-1信号诱发人黑色素瘤细胞凋亡,这为深入揭示黑色素瘤的发生机理提供了新思路。

• 单位
  深圳市罗湖区妇幼保健院; 生物化学教研室; 昆明医学院