霜天蛾昆虫变应原多克隆抗体的制备及免疫特性分析

作者：刘昀; 孙秀珍; 周玎; 李维; 米烈汉

来源：国际呼吸杂志, 2008, 28(23): 1417-1420.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2008.23.003

• 霜天蛾
• 变应原
• 多克隆抗体
• 免疫特性

目的 制备兔抗霜天蛾变应原多克隆抗体,分析其与特异性过敏患者血清抗体成分的异同,为免疫筛选cDNA文库,制备基因重组霜天蛾变应原奠定基础.方法 应用霜天蛾变应原提取液免疫家兔获得霜天蛾变应原多克隆抗体,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定混合免疫兔血清抗体效价:应用免疫印迹的方法对比分析免疫兔血清与特异性过敏患者血清抗体成分的异同.结果 混合免疫兔血清效价经ELISA检测,效价>1:10 000,免疫印迹检测兔抗血清免疫球蛋白G<IgG)可以特异性识别霜天蛾10种蛋白组分,相对分子质量分别为100 000、92 000、79 000、74 000、66 000、49 000、43 000、36 000、25 000和16 000;患者血清IgG可以识别6种蛋白组分,相对分子质量分别为79 000、74 000、66 000、49 000、36 000和25 000.结论 制备出的兔抗血清与特异性霜天蛾过敏患者血清特异性识别霜天蛾变应原的结果接近.比患者可以识别更多的蛋白条带,可以应用免疫兔血清作为筛选霜天蛾cDNA文库的探针及重组霜天蛾变应原表达蛋白的鉴定分析.

• 单位
  西安交通大学医学院第二附属医院