摘要

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGCS)是甲羟戊酸途径中的限速酶之一,其表达水平和催化活性会影响萜类及其衍生物的合成量。从红冬孢酵母(Rhodosporidium kratochvilovae)YM25235菌株中克隆了HMGCS基因,命名为RKHMGCS。序列分析结果显示,RKHMGCS包含一个1449 bp的开放阅读框,编码482个氨基酸。RKHMGCS编码的氨基酸序列与酵母来源的HMGCS具有更高的同源性,而且也具有HMGCS特征性保守的底物结合结构域和活性氨基酸位点,这些结果表明RKHMGCS基因是一个潜在的新的HMGCS基因。进一步将其转回到YM25235菌株中进行过表达,分析结果显示,RKHMGCS基因过表达使YM25235菌株中类胡萝卜素含量提高了约16.83%,但菌株中油脂积累量和脂肪酸含量反而降低,分别降低了约26.03%和15.97%,这与部分类胡萝卜素合成和油脂合成相关基因的转录分析结果一致。本研究初步揭示了过表达RKHMGCS基因对YM25235菌株中类胡萝卜素及其特定组分含量的影响,结果可为进一步通过代谢工程手段提高产油红酵母中类胡萝卜素及其特定组分含量的研究提供参考。