E6相关蛋白调节膜联蛋白A2的表达对三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤的影响

作者：侯令密; 谢少利; 陈茂山; 李敬东; Aduah Emmanuel Ajedichiga; 杨宏伟; 高砚春; 幸天勇; 邓世山; 赵小波

来源：中华妇幼临床医学杂志(电子版), 2016, 12(03): 274-279.

• 膜联蛋白A2
• E6相关蛋白
• 裸鼠移植瘤
• 印迹法,蛋白质
• 免疫组化

目的探讨E6相关蛋白(E6-AP)调节膜联蛋白A2的表达,对三阴性乳腺癌(TNBC)裸鼠移植瘤的影响。方法于2014年410月,选择40只雌性BALB/C-nu裸鼠为研究对象。按照随机数字表法,将其分为实验组(n=20)与对照组(n=20)。两组TNBC裸鼠移植瘤模型构建:设计针对E6-AP-RNA干扰靶点序列,将小干扰RNA(siRNA)片段转染至TNBC细胞株MDA-MB-231,再将此细胞株皮下注射于实验组裸鼠;而对照组裸鼠则皮下注射等量未转染E6-AP siRNA的TNBC细胞株MDA-MB-231。观察两组裸鼠移植瘤成瘤情况。采用Western blotting法检测两组TNBC裸鼠移植瘤E6-AP及膜联蛋白A2的相对表达量,采用免疫组化法检测两组TNBC裸鼠移植瘤膜联蛋白A2阳性表达率,并对这些指标进行统计学分析。本研究实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。两组裸鼠的周龄及体重等资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果 1成功构建两组TNBC裸鼠移植瘤模型,成瘤率均为100%。与对照组相比,实验组裸鼠移植瘤生长较慢,成瘤体积较小。实验组裸鼠移植瘤重量为(0.562±0.032)g,显著低于对照组的(1.202±0.012)g,二者比较,差异有统计学意义(t=96.792,P<0.001)。2Western blotting检测结果显示,实验组E6-AP相对表达量为11 168±441,显著低于对照组的24 284±636,二者比较,差异有统计学意义(t=75.737,P<0.001)。实验组膜联蛋白A2相对表达量为8 631±651,亦显著低于对照组的17 976±510,二者比较,差异有统计学意义(t=50.515,P<0.001)。3免疫组化检测结果显示,实验组膜联蛋白A2阳性表达率为33%,明显低于对照组的58%,二者比较,差异有统计学意义(χ2=5.796,P=0.016)。实验组TNBC裸鼠移植瘤膜联蛋白A2的积分光密度(IOD)值为17 976±239,显著低于对照组的26 565±329,二者比较,差异亦有统计学意义(t=94.439,P<0.001)。结论在人体内,膜联蛋白A2可能通过E6-AP介导发挥生物学作用。膜联蛋白A2表达降低,可抑制TNBC细胞增殖生长,可能成为TNBC诊断和治疗的新靶标。

• 单位
  川北医学院; 解剖学教研室; 遂宁市中心医院; 川北医学院附属医院