幽门螺杆菌BabA蛋白N段的基因克隆、表达纯化及体外粘附活性评价

作者：高涵; 薛利军; 刘小北; 冒晓蓓; 任丽丽; 耿建; 戴婷婷; 于锋; 褚晓源

来源：中国生物工程杂志, 2013, (03): 34-40.

DOI：10.13523/j.cb.20130306

• 幽门螺杆菌
• BabA1
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 粘附 Helicobacter pylori BabA1 Prokaryotic expression Protein purification Adhesion

目的:克隆幽门螺杆菌BabA蛋白的N段(氨基酸1-437位)基因(BabA1),构建其原核表达质粒,表达并纯化获得携带6×His标签的BabA1融合蛋白,评价融合蛋白的体外粘附活性。方法:以幽门螺杆菌J99菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得BabA1基因片段,并定向克隆至原核表达载体pET-32a(+)。经酶切及测序分析正确后,将重组质粒pET32a-BabA1转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行IPTG诱导表达,并对表达产物进行镍柱纯化、SDS-PAGE和Westernblot鉴定。采用菌落计数法评价BabA1融合蛋白在体外的细胞粘附活性。结果:成功扩增了BabA1基因,构建了p...

• 单位
  中国药科大学; 中国人民解放军东部战区总医院